ForeDirect RT-qPCR Dəsti
Kit təsviri:
◮RNT təmizləmə prosesləri olmadan tampon kolleksiyalarından RNT birbaşa real vaxt gücləndirilməsi üçün.Bu dəst bir saat ərzində qRT-PCR dövrlərini tamamlayır.Ferment qarışığı Reverse Transkriptaza, Hot-Start Taq DNT polimeraz, RNaz inhibitorunun optimallaşdırılmış qarışığıdır.Reaksiya Buferi optimallaşdırılmış bufer komponentləri, Mg daxil olmaqla, bütün tələb olunan komponentləri ehtiva edir2+, dUTP və dNTP.
Təsvir
ForeDirect RT-qPCR Kit, RNT təmizləmə prosesləri olmadan tampon kolleksiyalarından RNT-nin birbaşa real vaxt gücləndirilməsi üçün nəzərdə tutulmuşdur.Bu dəst bir saat ərzində qRT-PCR dövrlərini tamamlayır.Ferment qarışığı Reverse Transkriptaza, Hot-Start Taq DNT polimeraz, RNaz inhibitorunun optimallaşdırılmış qarışığıdır.Reaksiya Buferi optimallaşdırılmış bufer komponentləri, Mg daxil olmaqla, bütün tələb olunan komponentləri ehtiva edir2+, dUTP və dNTP.
Spesifikasiyalar
100T
Kit komponentləri
| Nuklein turşusu ayırıcı |
| RNT qoruyucusu |
| 2 × RT-qPCR Bufer |
| Ferment Qarışığı (Taq&M-MLV) |
| Təlimatlar |
PCR tətbiqi
1. PCR reaksiya boruları qısa müddətə sentrifuqa edildikdən sonra onları gücləndirici alətin nümunə çəninə qoyun.
2. Termal protokol
| addım | Temperatur | Vaxt | Velosipedlər | |
| 1 | Əks transkripsiya | 50℃ | 15 dəq | 1 |
| 2 | Əvvəlcədən denatürasiya | 95℃ | 1 dəq | 1 |
| 3 | Denatürasiya | 95℃ | 10 saniyə | 42 |
| 4 | Qızartma/uzatma | 60℃ | 30 saniyə | |
Qeyd:Floresan siqnalı hər dövrün uzadılması addımından dərhal sonra aşkar edilmişdir.
3. Quraşdırdıqdan sonra faylı yadda saxlayın və reaksiya proqramını işə salın.
Əməliyyat addımları
Reagent hazırlamazdan əvvəl, dəstdəki bütün reagentlər otaq temperaturunda əridilməlidir və yumşaq qarışdırılmalıdır.
Reagentin hazırlanması
1. Nuklein Turşusu Ayrılma Qarışıqını hazırlayın
| Komponent | Nümunə və ya Nəzarət üzrə Həcm |
| Nuklein turşusu ayırıcı | 5μL |
| RNT qoruyucusu | 0,5 μL |
2. Reaksiya Qarışığını hazırlayın
| Komponent | Nümunə və ya Nəzarət üzrə Həcm |
| 2 × RT-qPCR Bufer | 15 μL |
| Ferment Qarışığı (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Primerlər və zondlar | 1μL |
Saxlama və Raf ömrü
-Dəst -20-də saxlanmalıdır± 5℃.Etibarlılıq müddəti 12 aydır.
-Təkrar dondurma-ərimə dövrlərindən (<5 dövrə) çəkinin.
