• facebook
  • linkedin
  • youtube
English
səhifə_banneri

Foreasy HS Taq DNT Polimeraz

Foreasy HS Taq DNT Polimeraz Xüsusi Şəkil
  • Foreasy HS Taq DNT Polimeraz

Kit təsviri:

◮Yüksək spesifiklik: Yüksək isti başlanğıc aktivliyinə malik ferment.

◮Sürətli gücləndirmə: 10 san/kb.

◮Şablonun yüksək uyğunlaşması: Yüksəki səmərəli şəkildə gücləndirmək üçün istifadə edilə bilərGCdəyərvəgücləndirilməsi çətin olan müxtəlif DNT şablonları.

◮Güclü sədaqət: Sədaqət 6 dəfədirof adi Taq fermenti.

qabaqcıl güc


Məhsul təfərrüatı

Məhsul Teqləri

Tez-tez verilən suallar

Təsvir

Foreasy HS Taq DNT Polimerase gen rekombinasiya texnologiyası ilə Escherichia coli mühəndislik bakteriyalarında ifadə edilən yeni Taq fermentidir.Ferment xüsusi bir proseslə müalicə edildikdən sonra o's fəaliyyəti termal aktivləşdirmədən əvvəl maneə törədilir və beləliklə, aşağı temperatur şəraitində primerlərin və ya primer dimerlərin qeyri-spesifik tavlanması nəticəsində yaranan qeyri-spesifik gücləndirməni maneə törədir.Bu məhsul yüksək spesifik PCR reaksiyası üçün uyğundurion, M çoxlu x PCR , yüksək GC tərkibi (> 60%) ,iləikinci dərəcəli quruluşvə ya başqagüclü fon genomuicsgücləndirmə və geniş miqyaslı genomicsgücləndirmə aşkarlanması.Fermentin 5' → 3' DNT polimeraz aktivliyi və 5' → 3' ekzonukleaza aktivliyi var, lakin 3' → 5' ekzonükleaza aktivliyi yoxdur.

Kit komponentləri

Komponent IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNT Polimeraz (5 U/μL)  5000 U (1 ml)  50 KU (10 mL)  500 KU (100 mL)
2 × Taq Reaksiya Buferi  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Xüsusiyyətlər və üstünlüklər

- Yüksək spesifiklik: Yüksək isti başlanğıc aktivliyi olan ferment.

- Sürətli Gücləndirmə: 10 san/kb.

- Şablonun yüksək uyğunlaşması: Yüksəki səmərəli şəkildə gücləndirmək üçün istifadə edilə bilərGCdəyərvəgücləndirilməsi çətin olan müxtəlif DNT şablonları.

- Güclü sədaqət: Sədaqət 6 dəfədirof adi Taq fermenti.

Kit tətbiqi

- Müxtəlif PCR/qPCR Sistemi və birbaşa PCR sistemi

- PCR gücləndirilmiş DNT fraqmenti

- DNT işarəsi

- DNT ardıcıllığı

- PCR plus A quyruq

Fəaliyyət tərifi

1U: 10 nmol-u daxil etmək üçün lazım olan ferment miqdarıDNTaktivləşdirilmiş qızılbalıq sperma DNT-sini şablon/primer kimi istifadə edərək turşuda həll olunmayan maddəyə, 74 °C, 30 dəqiqə.

Reaksiya vəziyyəti

Temperatur Reaksiya vaxtı Döngə vaxtı
37°C 5 dəq 1
94°C 5 dəq 1
94°C 10 Saniyə  40
60°C 10 Saniyə

Qeyd:10 µL və 20 µL sistemlər üçün, əgər termal dövrənin istilik qapağı yoxdursa, bərabər həcmdə mineral yağ əlavə edin.

PCR reaksiya şərtləri şablonların, primerlərin və s. struktur şərtlərindən asılı olaraq dəyişir.Xüsusi əməliyyatda şablon növü, hədəf fraqmentin ölçüsü, gücləndirilmiş fraqmentin əsas ardıcıllığı və astarın GC məzmunu və uzunluğu kimi xüsusi şərtlərə uyğun olaraq optimal reaksiya şərtlərini, o cümlədən yumşalma temperaturu, uzadılma müddəti və s. layihələndirmək lazımdır.

Saxlama

-20 ± 5 °C-də 2 il və ya uzunmüddətli saxlama üçün -80 °C-də.

  • Əvvəlki:
  • Sonrakı:

    • Gücləndirmə siqnalları yoxdur

    1.Dəstdəki Taq DNT Polimerase düzgün saxlanmaması və ya dəstin istifadə müddəti bitməsi səbəbindən fəaliyyətini itirir.
    Tövsiyə: Kitin saxlanma şərtlərini təsdiqləyin;PCR sisteminə lazımi miqdarda Taq DNT Polimerase əlavə edin və ya əlaqəli təcrübələr üçün yeni Real Time PCR Kit satın alın.

    2.DNT şablonunda çoxlu Taq DNT Polimeraz inhibitorları var.
    Təklif: Şablonu yenidən təmizləyin və ya istifadə olunan şablonun miqdarını azaldın.

    3. Mg2+ konsentrasiyası uyğun deyil.
    Tövsiyə: Təqdim etdiyimiz 2× Real PCR Qarışığının Mg2+ konsentrasiyası 3,5 mM-dir.Bununla belə, bəzi xüsusi primerlər və şablonlar üçün Mg2+ konsentrasiyası daha yüksək ola bilər.Beləliklə, Mg2+ konsentrasiyasını optimallaşdırmaq üçün birbaşa MgCl2 əlavə edə bilərsiniz.Optimallaşdırma üçün hər dəfə Mg2+ 0,5 mM artırmaq tövsiyə olunur.

    4. PCR gücləndirmə şərtləri uyğun deyil və primerin ardıcıllığı və ya konsentrasiyası düzgün deyil.
    Təklif: primer ardıcıllığının düzgünlüyünü təsdiqləyin və primer pozulmayıb;gücləndirmə siqnalı yaxşı deyilsə, yumşalma temperaturunu aşağı salmağa və primer konsentrasiyasını müvafiq şəkildə tənzimləməyə çalışın.

    5.Şablonun miqdarı çox az və ya çoxdur.
    Tövsiyə: Şablon xəttiləşdirmə qradiyenti seyreltməsini həyata keçirin və Real Time PCR təcrübəsi üçün ən yaxşı PCR effekti ilə şablon konsentrasiyasını seçin.

    NTC çox yüksək flüoresan dəyərinə malikdir

    1. Əməliyyat zamanı yaranan reagentlərin çirklənməsi.
    Tövsiyə: Real Time PCR təcrübələri üçün yeni reagentlərlə əvəz edin.

    2.PZR reaksiya sisteminin hazırlanması zamanı çirklənmə baş verdi.
    Tövsiyə: Əməliyyat zamanı zəruri qoruyucu tədbirləri həyata keçirin, məsələn: lateks əlcəklər geyinmək, filtrli pipet ucundan istifadə etmək və s.

    3. Primerlər deqradasiyaya uğrayır və primerlərin deqradasiyası qeyri-spesifik gücləndirməyə səbəb olacaq.
    Təklif: Primerlərin deqradasiyası olub-olmadığını aşkar etmək üçün SDS-PAGE elektroforezindən istifadə edin və Real Time PCR təcrübələri üçün onları yeni primerlərlə əvəz edin.

    Primer dimer və ya qeyri-spesifik gücləndirmə

    1. Mg2+ konsentrasiyası uyğun deyil.
    Tövsiyə: Təqdim etdiyimiz 2× Real PCR EasyTM Mix-in Mg2+ konsentrasiyası 3,5 mM-dir.Bununla belə, bəzi xüsusi primerlər və şablonlar üçün Mg2+ konsentrasiyası daha yüksək ola bilər.Beləliklə, Mg2+ konsentrasiyasını optimallaşdırmaq üçün birbaşa MgCl2 əlavə edə bilərsiniz.Optimallaşdırma üçün hər dəfə Mg2+ 0,5 mM artırmaq tövsiyə olunur.

    2. PCR yumşalma temperaturu çox aşağıdır.
    Təklif: Hər dəfə PCR yumşalma temperaturunu 1℃ və ya 2℃ artırın.

    3. PCR məhsulu çox uzundur.
    Tövsiyə: Real Time PCR məhsulunun uzunluğu 100-150bp arasında olmalıdır, 500bp-dən çox olmamalıdır.

    4. Primerlər deqradasiyaya uğrayır və primerlərin deqradasiyası xüsusi gücləndirmənin yaranmasına səbəb olacaqdır.
    Təklif: Primerlərin deqradasiyası olub-olmadığını aşkar etmək üçün SDS-PAGE elektroforezindən istifadə edin və Real Time PCR təcrübələri üçün onları yeni primerlərlə əvəz edin.

    5. PCR sistemi düzgün deyil və ya sistem çox kiçikdir.
    Təklif: PCR reaksiya sisteminin çox kiçik olması aşkarlama dəqiqliyinin azalmasına səbəb olacaq.Real Time PCR təcrübəsini yenidən həyata keçirmək üçün kəmiyyət PCR aləti tərəfindən tövsiyə olunan reaksiya sistemindən istifadə etmək ən yaxşısıdır.

    Kəmiyyət qiymətlərinin zəif təkrarlanması

    1. Alət nasazdır.
    Təklif: Alətin hər bir PCR deşiyi arasında xətalar ola bilər ki, bu da temperaturun idarə edilməsi və ya aşkarlanması zamanı zəif təkrarlanma ilə nəticələnir.Müvafiq alətin təlimatlarına uyğun olaraq yoxlayın.

    2.Nümunə təmizliyi yaxşı deyil.
    Tövsiyə: Natəmiz nümunələr şablon və primerlərin təmizliyini ehtiva edən eksperimentin zəif təkrarlanmasına səbəb olacaq.Şablonu yenidən təmizləmək ən yaxşısıdır və primerlər SDS-PAGE ilə ən yaxşı şəkildə təmizlənir.

    3. PCR sisteminin hazırlanması və saxlanma müddəti çox uzundur.
    Təklif: Hazırlandıqdan dərhal sonra PCR təcrübəsi üçün Real Time PCR sistemindən istifadə edin və onu çox uzun müddət kənarda saxlamayın.

    4. PCR gücləndirmə şərtləri uyğun deyil və primerin ardıcıllığı və ya konsentrasiyası düzgün deyil.
    Təklif: primer ardıcıllığının düzgünlüyünü təsdiqləyin və primer pozulmayıb;gücləndirmə siqnalı yaxşı deyilsə, yumşalma temperaturunu aşağı salmağa və primer konsentrasiyasını müvafiq şəkildə tənzimləməyə çalışın.

    5. PCR sistemi düzgün deyil və ya sistem çox kiçikdir.
    Təklif: PCR reaksiya sisteminin çox kiçik olması aşkarlama dəqiqliyinin azalmasına səbəb olacaq.Real Time PCR təcrübəsini yenidən həyata keçirmək üçün kəmiyyət PCR aləti tərəfindən tövsiyə olunan reaksiya sistemindən istifadə etmək ən yaxşısıdır.

    Mesajınızı buraya yazın və bizə göndərin

    ƏlaqədarMəhsullar

    Axtarmaq üçün enter düyməsini və ya bağlamaq üçün ESC düyməsini basın