Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (Nümunə Alma Alətləri olmadan) Protokolu
Kit təsviri:
DNT-nin ayrıca çıxarılması olmadan, sürətli və yüksək həssaslıqla, PCR gücləndirilməsi üçün şablon kimi birbaşa heyvan toxuması lizatından istifadə edin.Yanlış pozitivləri aradan qaldırmaq üçün UNG çirklənmə əleyhinə sistem əlavə edildi.
◮Heç bir vaxt aparan və bahalı DNT təmizlənməsi tələb olunmur.
◮Nümunə tələbi kiçikdir, sadəcə bir toxum götürün.
◮Taşlama və əzmə kimi xüsusi müalicə tələb olunmur və əməliyyat sadədir.
◮Optimallaşdırılmış PCR sistemi PCR-nin daha yüksək spesifikliyə və PCR reaksiya inhibitorlarına qarşı daha güclü tolerantlığa malik olmasına imkan verir.
Təsvirlər
Bu dəst PCR reaksiyaları üçün heyvan toxuması nümunələrindən genomik DNT-ni tez bir zamanda buraxmaq üçün unikal lizis bufer sistemindən istifadə edir, buna görə də geniş miqyaslı genetik testlər üçün xüsusilə uyğundur.
Lizis tamponundan genomik DNT-nin ayrılması prosesi 65°C-də 10-30 dəqiqə ərzində tamamlanır.Protein və RNT-nin çıxarılması kimi başqa proseslər tələb olunmur və buraxılmış iz DNT PCR reaksiyası üçün şablon kimi istifadə edilə bilər.
2 × PCR AsanTMMix (UNG) 2×PCR Easy əsasında dTTP əvəzinə dUTP istifadə edirTMQarışdırın və eyni zamanda tərkibində dUTP olan şablonu pisləşdirə bilən UNG fermentini (Urasil-N-qlikosilaz) əlavə edin.PCR reaksiyasından əvvəl UNG fermenti urasil olan PCR məhsulunu parçalamaq üçün istifadə olunur.UNG fermenti urasil olmayan şablona heç bir təsir göstərməyəcək və bununla da gücləndirmənin spesifikliyini və dəqiqliyini təmin edəcək və geniş miqyaslı genetik sınaq zamanı PCR məhsullarının çirklənməsinin qarşısını alacaq.
D-Taq DNT polimeraza birbaşa PCR reaksiyaları üçün Foregene tərəfindən xüsusi olaraq hazırlanmış DNT polimerazdır.D-Taq DNT polimerazı müxtəlif PCR reaksiya inhibitorlarına qarşı güclü tolerantlığa malikdir və müxtəlif mürəkkəb reaksiya sistemlərində DNT-nin iz miqdarını səmərəli şəkildə gücləndirə bilər və gücləndirmə sürəti 2Kb/dəq-ə çata bilər ki, bu da birbaşa PCR reaksiyası üçün xüsusilə uyğundur.
Kit komponentləri
| I hissə | Bufer AL |
| Foregene Proteaz | |
| 6 × DNT Yükləmə Tamponu | |
| II hissə | 2 × PCR AsanTMMix(UNG) |
Xüsusiyyətlər və üstünlüklər
■Çox vaxt aparan və bahalı DNT-nin təmizlənməsi
■ Nümunə tələbi kiçikdir, 5 mq heyvan toxuması sınaqdan keçirilə bilər.
■ Taşlama və əzmə kimi xüsusi müalicə tələb olunmur və əməliyyat sadədir.
■ Optimallaşdırılmış PCR sistemi PCR-nin daha yüksək spesifikliyə və PCR reaksiya inhibitorlarına qarşı daha güclü tolerantlığa malik olmasını təmin edir.
■ Çirklənmə əleyhinə PCR sistemi 2×PCR asanTMMix (UNG) PCR məhsullarının yaratdığı çirklənməni effektiv şəkildə aradan qaldırır və gücləndirmənin spesifikliyini və dəqiqliyini təmin edir.
Kit parametrləri
Tətbiq: müxtəlif heyvan toxumaları.
Nümunə lizizindən ayrılan DNT: yalnız PCR şablonu kimi istifadə olunur.
Kitdən aşağıdakı məqsədlər üçün istifadə edilə bilər: transgenozun identifikasiyası, heyvanların genotiplənməsi və s.
İş axını
Saxlama və Raf ömrü
Bu dəstin I hissəsi 2-8-də saxlanmalıdır℃.
Buffer AL reagenti quru şəraitdə 12 ay saxlanıla bilər;2-8-də saxlanıla bilər℃daha uzun saxlama üçün.
Reagent Foregene Protease unikal formuluna malikdir.Fəaliyyətini və sabitliyini təmin etmək üçün onu 4-də saxlayın℃12 ay müddətinə.
Reagent 6×DNT Yükləmə Buferi 4-də saxlanıla bilər℃və ya -20℃uzun müddətə.
Bu dəstin II hissəsi -20-də saxlanmalıdır℃.
Reagent 2×PCR asanTMMix(UNG), tez-tez istifadə olunarsa, 4-də də saxlanıla bilər℃qısamüddətli saxlama üçün (10 gün ərzində istifadə edin).
