Birbaşa RT-qPCR Kit
Kit təsviri:
◮ Unikal reaksiya tamponu ilə Foregene tərəfindən hazırlanmış Foreasy Reverse Transkriptaza və Foreasy HS Taq DNT Polimerazdan istifadə edən Direct RT-qPCR Kit bu dəsti güclü müqavimət və uyğunluqla hazırlayır və Foregene Lysis sistemindən şablon kimi reaksiya istifadəsini birbaşa sınaqdan keçirə bilər.Bu dəst COVID-19 nuklein turşusu aşkarlama dəsti və digər patogen bakteriyaların nuklein turşusu aşkarlama dəstinin hazırlanması üçün tətbiq oluna bilər.
Təsvir
Direct RT-qPCR Kit ayrıca paketlənmiş RT-qPCR buferi və yüksək effektiv ferment təmin edir.qarışıq(Taq、M-MLV、RI)， onu arxa uç dəstləri və sistemin yaradılması üçün rahat edirtənzimləmə, sadə yoxlama çərçivəsində.
Spesifikasiyalar
500T, 50.000T
Kit komponentləri
| Kit məzmunu (20 μL reaksiya sistemi) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Birbaşa ferment qarışığı | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2 × Birbaşa RT-qPCR Bufer | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Təlimat | 1 | 1 |
Əməliyyat addımları
Reagent hazırlamazdan əvvəl, dəstdəki bütün reagentlər otaq temperaturunda əridilməlidir və yumşaq qarışdırılmalıdır.
A: Hazırlayın of şablon və reagent
1. Hazırlanmış RNT şablonunu (RNT şablonunu çıxarmaq və təmizləmək üçün Foregene Total RNT Isolation Kit seriyasından istifadə etmək tövsiyə olunur) və ya nümunə krekinq məhsulunu (Foregene Lysis sistemindən istifadə etmək tövsiyə olunur), spesifik primerləri (10 μM) və digər müvafiq istehlak materiallarını, aləti hazırlayın.
2. 2× Direct RT-qPCR Bufer, RNase-Free ddH2O və 20× ROX Referans Boyası (əgər varsa) qoyun's lazımdır) buz ilə qutuda, bunları təbii şəkildə əridir və yumşaq bir şəkildə qarışdırın.
B: Hazırlayın of RT-qPCR sistemi
Cədvəl 1 : Hazırlayın of RT-qPCR ssistem
| Komponent | Həcmi | Son konsentrasiya |
| 2 × Birbaşa RT-qPCR Bufer | 10 μL | 1× |
| Birbaşa ferment qarışığı | 1μL | |
| İrəli Astar (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Əks Astar (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Zond (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Şablon (RNT və ya Lizat) | X μL | |
| 20×ROX İstinad Boyası | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Ümumi Həcmi | 20μL |
C: Set the RT-qPCR reaksiya proqram
Cədvəl 2 : RT-qPCR reaksiyaon proqram qəbulu (üçün misal: iki-addım üsul)
| addım | Temperatur | Vaxt | Velosipedlər | Məzmun | |
| 1 | 50℃ | 15 dəq | 1* | 1 | Əks transkripsiya |
| 2 | 95℃ | 1 dəq | 1 | Əvvəlcədən denatürasiya | |
| 3 | 95℃ | 10 san | 40-45 | Denatürasiya | |
| 60℃ | 30 saniyə 2* | Qızartma/uzatma | |||
Saxlama və Raf ömrü
-Dəst -20-də saxlanmalıdır± 5℃.Etibarlılıq müddəti 12 aydır.
-Təkrar dondurma-ərimə dövrlərindən (<5 dövrə) çəkinin.
