Təmizlənməmiş Nümunə üçün 2× Konsentratlı Premiks üçün Çin İstehsalçısı Real-Time Kəmiyyət PCR Birbaşa Multipleks Probu Qpcr Mix Plus U
Təşkilat “elmi idarəetmə, yüksək keyfiyyət və səmərəliliyin üstünlüyü, təmizlənməmiş Nümunə üçün 2× Konsentratlı Premiks Real-Time Kəmiyyətli PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U üçün Çin üçün İstehsalçı üçün ən üstün alıcı” prosedur konsepsiyasını davam etdirir.
Təşkilat “elmi idarəetmə, yüksək keyfiyyət və səmərəlilik prioritetliyi, alıcı üçün alilik” prosedur konsepsiyasını davam etdirir.Çin Taq DNT Polimeraz və Qpcr, Şirkətimiz zəngin gücə malikdir və sabit və mükəmməl satış şəbəkəsi sisteminə malikdir.İstəyirik ki, daxili və xaricdəki bütün müştərilərlə qarşılıqlı fayda əsasında sağlam işgüzar əlaqələr qura bilək.
Real Time PCR primer dizayn prinsipləri
İrəli Astar və Ters Astar
Real Time PCR üçün primer dizaynı çox vacibdir.Primerlər PCR gücləndirilməsinin spesifikliyi və səmərəliliyi ilə bağlıdır və aşağıdakı prinsiplərə istinad edərək tərtib edilə bilər:
- Astar uzunluğu: 18-30bp.
- GC tərkibi: 40-60%.
- Tm dəyəri: Primer 5 kimi primer dizayn proqramı primerin Tm dəyərini verə bilər.Yuxarı və aşağı axın primerlərinin Tm dəyərləri mümkün qədər yaxın olmalıdır.Tm hesablama düsturu da istifadə edilə bilər: Tm = 4 °C (G + C) + 2 ° C (A + T).PCR həyata keçirərkən, 5 °C primer Tm dəyərindən aşağı olan temperatur ümumiyyətlə yumşalma temperaturu kimi seçilir (bağlama temperaturunda müvafiq artım PZR reaksiyasının spesifikliyini artıra bilər).
- Primerlər və PCR məhsulları:
- Dizayn primerinin PCR gücləndirmə məhsulunun uzunluğu tercihen 100-150bp-dir.
- Şablonun ikinci dərəcəli struktur sahəsindəki dizayn astarlarından mümkün qədər çəkinmək lazımdır.
- Yuxarı və aşağı axın primerlərinin 3′ ucları arasında 2 və ya daha çox tamamlayıcı əsasın əmələ gəlməsindən çəkinin.
- Primer 3′ terminal bazası əlavə 3 ardıcıl G və ya C ilə mövcud ola bilməz.
- Astarların özləri tamamlayıcı strukturlara malik ola bilməzlər, əks halda PCR gücləndirilməsinə təsir edən saç tıxacının quruluşu yaranacaq.
- ATCG primer ardıcıllığında mümkün qədər bərabər paylanmalı və T kimi 3′ terminal bazasından qaçınılmalıdır.
Əlavə1:Cell DirectRT-qPCR Komponent dəstit əlavə paketi
1.Hüceyrə lizisi məhlulu
Hüceyrə lizisi məhlulu | |||
Kit komponentləri (24 quyu lizis sistemi / quyu) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
HissəI | Bufer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Proteaz Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Bufer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
HissəII | DNT pozan | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Kit komponentləri (20 μl reaksiya sistemi) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Birbaşa RT Qarışığı | 800 μl |
RNazsız ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Qarışığı | ||
Kit komponentləri (20 μl reaksiya sistemi) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × Birbaşa qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX İstinad Boyası | 40 μl | 200 μl |
RNazsız ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Təşkilat “elmi idarəetmə, yüksək keyfiyyət və səmərəliliyin üstünlüyü, təmizlənməmiş Nümunə üçün 2× Konsentratlı Premiks Real-Time Kəmiyyətli PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U üçün Çin üçün İstehsalçı üçün ən üstün alıcı” prosedur konsepsiyasını davam etdirir.
Çin üçün istehsalçıÇin Taq DNT Polimeraz və Qpcr, Şirkətimiz zəngin gücə malikdir və sabit və mükəmməl satış şəbəkəsi sisteminə malikdir.İstəyirik ki, daxili və xaricdəki bütün müştərilərlə qarşılıqlı fayda əsasında sağlam işgüzar əlaqələr qura bilək.
Real Time PCR primer dizayn prinsipləri
İrəli Astar və Ters Astar
Real Time PCR üçün primer dizaynı çox vacibdir.Primerlər PCR gücləndirilməsinin spesifikliyi və səmərəliliyi ilə bağlıdır və aşağıdakı prinsiplərə istinad edərək tərtib edilə bilər:
- Astar uzunluğu: 18-30bp.
- GC tərkibi: 40-60%.
- Tm dəyəri: Primer 5 kimi primer dizayn proqramı primerin Tm dəyərini verə bilər.Yuxarı və aşağı axın primerlərinin Tm dəyərləri mümkün qədər yaxın olmalıdır.Tm hesablama düsturu da istifadə edilə bilər: Tm = 4 °C (G + C) + 2 ° C (A + T).PCR həyata keçirərkən, 5 °C primer Tm dəyərindən aşağı olan temperatur ümumiyyətlə yumşalma temperaturu kimi seçilir (bağlama temperaturunda müvafiq artım PZR reaksiyasının spesifikliyini artıra bilər).
- Primerlər və PCR məhsulları:
- Dizayn primerinin PCR gücləndirmə məhsulunun uzunluğu tercihen 100-150bp-dir.
- Şablonun ikinci dərəcəli struktur sahəsindəki dizayn astarlarından mümkün qədər çəkinmək lazımdır.
- Yuxarı və aşağı axın primerlərinin 3′ ucları arasında 2 və ya daha çox tamamlayıcı əsasın əmələ gəlməsindən çəkinin.
- Primer 3′ terminal bazası əlavə 3 ardıcıl G və ya C ilə mövcud ola bilməz.
- Astarların özləri tamamlayıcı strukturlara malik ola bilməzlər, əks halda PCR gücləndirilməsinə təsir edən saç tıxacının quruluşu yaranacaq.
- ATCG primer ardıcıllığında mümkün qədər bərabər paylanmalı və T kimi 3′ terminal bazasından qaçınılmalıdır.
Əlavə1:Cell DirectRT-qPCR Komponent dəstit əlavə paketi
1.Hüceyrə lizisi məhlulu
Hüceyrə lizisi məhlulu | |||
Kit komponentləri (24 quyu lizis sistemi / quyu) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
HissəI | Bufer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Proteaz Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Bufer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
HissəII | DNT pozan | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Kit komponentləri (20 μl reaksiya sistemi) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Birbaşa RT Qarışığı | 800 μl |
RNazsız ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Qarışığı | ||
Kit komponentləri (20 μl reaksiya sistemi) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × Birbaşa qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX İstinad Boyası | 40 μl | 200 μl |
RNazsız ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Təlimat kitabçaları: