Qan RNT İzolyasiya Kiti
Kit təsviri:
Cat.No.RE-04011/04013
Tam qandan ümumi RNT təmizlənməsi üçün 104 ≤ Ağ Qan Hüceyrələri ≤ 107
Qan RNT-ni ağ qan hüceyrələrindən sürətlə təcrid edin və təmizləyin.
-RNT deqradasiyasından narahat olmaq lazım deyil.Bütün dəst RNasesizdir
-Sadə—bütün əməliyyatlar otaq temperaturunda tamamlanır
-Sürətli—əməliyyat 20 dəqiqə ərzində tamamlana bilər
-Yüksək RNT məhsuldarlığı: yalnız RNT sütunu və unikal formula RNT-ni effektiv şəkildə təmizləyə bilər
-Təhlükəsiz—üzvi reagent istifadə olunmur
-Böyük nümunə emal gücü—hər dəfə 200μl-ə qədər nümunə emal edilə bilər.
-Yüksək keyfiyyət—təmizlənmiş RNT yüksək dərəcədə safdır, zülal və digər çirklərdən azaddır və müxtəlif eksperimental tətbiqlərə cavab verə bilər.
Təsvirlər
Dəst, antikoaqulyasiya edilmiş tam qandan yüksək saflıqda və yüksək keyfiyyətli ümumi RNT-ni səmərəli şəkildə çıxara bilən şirkətimiz tərəfindən hazırlanmış spin sütununu və formulasını qəbul edir.Dəst qırmızı qan hüceyrələrini tez və effektiv şəkildə parçalaya bilən və ağ qan hüceyrələrini saxlaya bilən qırmızı qan hüceyrə lizatını (Bufer RCL) təmin edir.Effektiv DNT Təmizləyici Kolunm asanlıqla supernatantı və hüceyrə lizatlarını ayıra və genomik DNT-ni adsorbsiya edib çıxara bilər.Əməliyyat sadədir və vaxta qənaət edir;Yalnız RNT-dən ibarət Sütun RNT-ni effektiv şəkildə bağlaya bilir və unikal formulla eyni vaxtda çoxlu sayda nümunəni emal edə bilir.
Bütün sistem RNase-Free çıxarılan RNT-ni parçalanmayan edir;Bufer RW1 və Bufer RW2 tampon yuma sistemi əldə edilən RNT-ni zülaldan, DNT-dən, ionlardan və üzvi birləşmələrdən təmizləyir.
Kit İçindəkilər
| Qan Ümumi RNT İzolyasiya Kiti | ||
| Kit tərkibi | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 dəfə | 200 dəfə | |
| Bufer RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
| Bufer BRL1* | 30 ml | 120 ml |
| Bufer BRL2 | 18 ml | 66 ml |
| Bufer RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Bufer RW2 | 24 ml | 96 ml |
| RNazsız ddH2 O | 10 ml | 40 ml |
| Yalnız RNT Sütun | 50 dəst | 200 dəst |
| DNT Təmizləmə Sütunu | 50 dəst | 200 dəst |
| təlimat | 1 nüsxə | 1 nüsxə |
Xüsusiyyətlər və üstünlüklər
-RNT deqradasiyasından narahat olmaq lazım deyil.Bütün dəst RNasesizdir.
-Sadə—bütün əməliyyatlar otaq temperaturunda tamamlanır.
-Sürətli—əməliyyat 20 dəqiqə ərzində tamamlana bilər.
-Yüksək RNT məhsuldarlığı: yalnız RNT sütunu və unikal formula RNT-ni effektiv şəkildə təmizləyə bilər.
-Təhlükəsiz—üzvi reagent istifadə olunmur.
-Böyük nümunə emal gücü—hər dəfə 200μl-ə qədər nümunə emal edilə bilər.
-Yüksək keyfiyyət—təmizlənmiş RNT yüksək dərəcədə safdır, zülal və digər çirklərdən azaddır və müxtəlif eksperimental tətbiqlərə cavab verə bilər.
Kit parametrləri
Kit tətbiqi:
Məməlilərin tam qanından ümumi RNT-nin çıxarılması və təmizlənməsi üçün uyğundur.
İş axını
Saxlama şəraiti
Bufer RCL (10×) 2-8 ℃ temperaturda saxlanmalıdır;Kitin digər komponentləri quru şəraitdə otaq temperaturunda (15-25 ℃) saxlanıla bilər və 12 ay saxlanıla bilər.BRL1 tamponu β-merkaptoetanol (isteğe bağlı) əlavə edildikdən sonra 1 ay müddətində 4 ℃ temperaturda saxlanıla bilər.
Qeyd: Aşağı temperaturda saxlanılırsa, məhlul çöküntüyə meyllidir.İstifadədən əvvəl məhlulu bir müddət otaq temperaturunda dəstdə yerləşdirdiyinizə əmin olun.Lazım gələrsə, çöküntünü həll etmək üçün onu 37°C su banyosunda 10 dəqiqə əvvəlcədən qızdırın və istifadə etməzdən əvvəl yaxşıca qarışdırın.
Problemlərin təhlili üçün təlimatlar
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Heç bir RNT çıxarıla bilməz və ya nuklein turşusunun məhsuldarlığı aşağıdır
Adətən bərpa səmərəliliyinə təsir edən bir çox amil var, məsələn: nümunə RNT tərkibi, əməliyyat metodu, elüsiya həcmi və s..
Ümumi səbəblərin təhlili:
1.Buz vannası və ya əməliyyat zamanı aşağı temperaturda (4°C) sentrifuqasiya.
Təklif: Otaq temperaturu (15-25 ° C) işləmə, heç vaxt buz vannası və aşağı temperaturlu sentrifuqa.
2. Nümunənin düzgün saxlanmaması və ya nümunənin çox uzun müddət saxlanılması.
Təklif: Nümunələri -80 ° C-də saxlayın və ya maye azotda dondurun və təkrar dondurma-ərimə istifadəsindən çəkinin;RNT çıxarılması üçün təzə toplanmış nümunələrdən istifadə etməyə çalışın.
3. Qeyri-kafi nümunə lizisi
Tövsiyə: Nümunənin və işçi məhlulun (Xətti Akrilamid) hərtərəfli qarışdırıldığından və otaq temperaturunda (15-25°C) 10 dəqiqə inkubasiya olunduğundan əmin olun.
4. Eluent səhv əlavə edilib
Tövsiyə: RNase-Free ddH2O-nun təmizləyici sütunun membranının ortasına əlavə olunduğundan əmin olun.
5. Bufer viRW2-də susuz etanolun düzgün olmayan həcmi
Təklif: Təlimatlara əməl edin, viRW2 tamponuna düzgün həcmdə susuz etanol əlavə edin və dəsti istifadə etməzdən əvvəl yaxşıca qarışdırın.
6.Yanlış nümunə istifadəsi.
Təklif: 500μl Bufer viRL üçün 200µl nümunə.Həddindən artıq nümunə həcmi RNT hasilatı sürətinin azalması ilə nəticələnəcək.
7.Yanlış elüsyon həcmi və ya natamam elüsyon.
Təklif: Təmizləmə sütununun eluent həcmi 30-50μl-dir;elüsyon effekti qənaətbəxş deyilsə, əvvəlcədən qızdırılan RNase-Free ddH əlavə etmək tövsiyə olunur.2O və otaq temperaturunda yerləşdirmə müddətini uzatın, məsələn 5-10min
8.Təmizləmə sütununda viRW2 Buferində yuyulduqdan sonra etanol qalığı var.
Təklif: Bufer viRW2-də yuyulduqdan və 2 dəqiqə boş boru sentrifuqasından sonra etanol hələ də qalırsa, qalan etanolun tamamilə çıxarılması üçün təmizləyici sütun boş boru sentrifuqasından sonra otaq temperaturunda 5 dəqiqə qala bilər.
Təmizlənmiş RNT molekullarının deqradasiyası
Təmizlənmiş RNT-nin keyfiyyəti nümunənin saxlanması, RNaz ilə çirklənməsi və əməliyyat kimi amillərlə bağlıdır.
Ümumi səbəblərin təhlili:
1.Toplanmış nümunələr vaxtında saxlanmayıb.
Təklif: Nümunə yığıldıqdan sonra vaxtında istifadə olunmazsa, onu dərhal -80 ℃ və ya maye azotda saxlayın.RNT molekullarının çıxarılması üçün mümkün olduqda təzə toplanmış nümunələrdən istifadə etməyə çalışın.
2.Toplanan nümunələr dəfələrlə dondurulur və əridilir.
Təklif: Nümunələrin toplanması və saxlanması zamanı təkrar dondurma və əritmədən (bir dəfədən çox olmamaqla) çəkinin, əks halda nuklein turşusunun məhsuldarlığı azalacaq.
3.RNase əməliyyat otağında tətbiq olundu və ya birdəfəlik əlcək, maska və s. taxılmadı.
Təklif: RNT molekullarının çıxarılması təcrübəsi ən yaxşı şəkildə ayrıca RNT əməliyyat otağında aparılır və təcrübə masası təcrübədən əvvəl təmizlənir.Təcrübə zamanı RNaz-ın tətbiqi nəticəsində RNT deqradasiyasının qarşısını almaq üçün birdəfəlik əlcəklər və maskalar taxın.
4. İstifadə zamanı reagent RNaz ilə çirklənmişdir.
Təklif: Əlaqədar təcrübələr üçün yeni Viral RNT İzolyasiya Kiti ilə əvəz edin.
5.Sentrifuqa borularının, pipet uclarının və s. RNase ilə çirklənməsi. Təklif: sentrifuqa borularının, pipet uclarının və pipetlərin hamısının RNazsız olduğuna əmin olun.
Təmizlənmiş RNT molekulları aşağı axın təcrübələrinə təsir etdi
Təmizləmə sütunu ilə təmizlənmiş RNT molekulları, həddindən artıq duz ionları və ya zülallar olduqda, aşağı axın təcrübələrinə təsir edəcək, məsələn: tərs transkripsiya, Northern Blot və s..
1.Elüt edilmiş RNT molekullarında duz ionları qalır.
Tövsiyə: Bufer viRW2-yə düzgün həcmdə susuz etanol əlavə olunduğundan əmin olun və əməliyyat təlimatlarında göstərilən düzgün sentrifuqa sürətinə uyğun olaraq təmizləmə sütununu iki dəfə yuyun; Əgər duz ionları hələ də qalırsa, siz təmizləyici sütuna viRW2 tamponunu əlavə edib otaq temperaturunda 5 dəqiqə buraxa bilərsiniz.Daha sonra duz ionlarının çirklənməsini maksimum dərəcədə aradan qaldırmaq üçün sentrifuqa edin
2.Elüt edilmiş RNT molekullarında qalan etanol var
Təklif: təmizləyici sütunların Bufer viRW2 ilə yuyulduğunu təsdiqlədikdən sonra, əməliyyat təlimatlarında göstərilən mərkəzdənqaçma sürətinə uyğun olaraq boş boru sentrifuqasını həyata keçirin.Əgər hələ də etanol qalırsa, qalan etanolu maksimum dərəcədə çıxarmaq üçün boş boru sentrifuqasından sonra otaq temperaturunda 5 dəqiqə buraxıla bilər.
Təlimat kitabçaları:
Viral RNT İzolyasiya Kiti Təlimat Kitabı
