İmmunoqlobulinlər (Ig) adlanan antikorlar xüsusi olaraq antigenlərə bağlanan qlikoproteinlərdir.
 
Adi antikor preparatı heyvanların immunizasiyası və antiserumun toplanması yolu ilə istehsal olunur.Buna görə də, antiserum adətən digər əlaqəli olmayan antigenlərə və zərdabdakı digər protein komponentlərinə qarşı antikorları ehtiva edir.Ümumi antigen molekulları əsasən çoxlu müxtəlif epitoplardan ibarətdir, buna görə də adi antikorlar da çoxlu müxtəlif epitoplara qarşı antikorların qarışığıdır.Hətta eyni epitopa qarşı yönəlmiş adi serum antikorları hələ də müxtəlif B hüceyrə klonları tərəfindən istehsal olunan heterojen antikorlardan ibarətdir.Buna görə də, adi serum antikorlarına poliklonal antikorlar və ya qısaca poliklonal antikorlar da deyilir.
 
Monoklonal antikor (monoklonal antikor) tək B hüceyrə klonu tərəfindən istehsal olunan və yalnız müəyyən bir epitopa qarşı yönəldilmiş yüksək vahid antikordur.O, adətən hibridom texnologiyası ilə hazırlanır - hibridom antikor texnologiyası B hüceyrələrini spesifik antikorlar və sonsuz böyümə qabiliyyətinə malik miyeloma hüceyrələrini B hüceyrə hibridomalarına ifraz etmək qabiliyyəti ilə birləşdirən hüceyrə birləşmə texnologiyasına əsaslanır.Bu hibridom hüceyrəsi ana hüceyrənin xüsusiyyətlərinə malikdir.O, miyelom hüceyrələri kimi qeyri-müəyyən və ölümsüz in vitro şəkildə yayıla bilər və dalaq lenfositləri kimi spesifik antikorları sintez edib ifraz edə bilər.Klonlaşdırma yolu ilə tək hibridoma hüceyrəsindən alınan monoklonal xətt, yəni hibridoma hüceyrə xətti əldə edilə bilər.Onun istehsal etdiyi antikorlar eyni antigen determinantına, yəni monoklonal antikorlara qarşı yüksək homogen anticisimlərdir.
 
Antikorlar bir və ya bir neçə Y şəkilli monomer (yəni, monoklonal antikorlar və ya poliklonal antikorlar) şəklində mövcuddur.Hər bir Y formalı monomer iki eyni ağır zəncir və iki eyni yüngül zəncir daxil olmaqla 4 polipeptid zəncirindən ibarətdir.Yüngül zəncir və ağır zəncir molekulyar çəkilərinə görə adlandırılır.Y-şəkilli strukturun yuxarı hissəsi antigen bağlama yeri olan dəyişkən bölgədir.(Detai Bio-Monoklonal Antikor Konseptindən çıxarış)
 
Antikor quruluşu
Ağır zəncir
Yunan α, δ, ε, γ və μ hərfləri ilə adlandırılan beş növ məməli Ig ağır zəncirləri var.Müvafiq antikorlar IgA, IgD, IgE, IgG və IgM adlanır.Müxtəlif ağır zəncirlər ölçüsü və tərkibi ilə fərqlənir.α və γ təxminən 450 amin turşusu, μ və ε isə təxminən 550 amin turşusu ehtiva edir.
Hər bir ağır zəncirin iki bölgəsi var: sabit bölgə və dəyişən bölgə.Eyni tipli bütün antikorlar eyni sabit bölgəyə malikdir, lakin müxtəlif növ antikorlar arasında fərqlər var.Ağır zəncirlərin γ, α və δ sabit bölgələri çevikliyini artırmaq üçün menteşə bölgəsi ilə tandemdə üç Ig domenindən ibarətdir;μ və ε ağır zəncirlərinin sabit bölgələri 4 Ig domenindən ibarətdir.Fərqli B hüceyrələri tərəfindən istehsal edilən antikorun ağır zəncirinin dəyişən bölgəsi fərqlidir, lakin eyni B hüceyrəsi və ya hüceyrə klonu tərəfindən istehsal olunan antikorun dəyişən bölgəsi eynidir və hər bir ağır zəncirin dəyişən bölgəsi təxminən 110 amin turşusu uzunluğundadır., Və tək Ig domeni təşkil edir.
 
Yüngül zəncir
Məməlilərdə yalnız iki növ yüngül zəncir var: lambda növü və kappa növü.Hər bir yüngül zəncir iki əlaqəli domenə malikdir: sabit bölgə və dəyişən bölgə.Yüngül zəncirinin uzunluğu təxminən 211 ~ 217 amin turşusudur.Hər bir antikorun tərkibində olan iki yüngül zəncir həmişə eynidir.Məməlilər üçün hər bir antikordakı yüngül zəncir yalnız bir növə malikdir: kappa və ya lambda.Bəzi aşağı onurğalılarda, məsələn, qığırdaqlı balıqlarda (qığırdaqlı balıqlar) və sümüklü balıqlarda, iota (iota) növü kimi yüngül zəncirlərin digər növlərinə də rast gəlinir.
 
Fab və Fc seqmentləri
Fc seqmenti antikorları etiketləmək üçün birbaşa fermentlər və ya flüoresan boyalarla birləşdirilə bilər.Bu, ELISA prosesi zamanı antikorun lövhədə pərçimləndiyi hissədir və eyni zamanda ikinci antikorun immunoprecipitasiya, immunoblotinq və immunohistokimyada tanındığı və bağlandığı hissədir.Antikorlar papain kimi proteolitik fermentlər tərəfindən iki F(ab) seqmentinə və bir Fc seqmentinə hidrolizə oluna bilər və ya onlar pepsin tərəfindən menteşə bölgəsindən parçalana və bir F(ab)2 seqmentinə və bir Fc seqmentinə hidroliz edilə bilər.IgG antikor fraqmentləri bəzən çox faydalıdır.Fc seqmentinin olmaması səbəbindən F(ab) seqmenti antigenlə çökməyəcək və in vivo tədqiqatlarda immun hüceyrələr tərəfindən tutulmayacaq.Kiçik molekulyar fraqmentlərə və çarpaz əlaqə funksiyasının olmamasına görə (Fc seqmentinin olmaması səbəbindən) Fab seqmenti adətən funksional tədqiqatlarda radiolabelinq üçün istifadə olunur və Fc seqmenti əsasən histokimyəvi boyanmada bloklayıcı agent kimi istifadə olunur.
 
Dəyişən və sabit bölgələr
Dəyişən bölgə (V bölgəsi) N-terminusun yaxınlığında H zəncirinin 1/5 və ya 1/4 hissəsində (təxminən 118 amin turşusu qalıqları ehtiva edir) və L zəncirinin N-terminusunun yaxınlığında 1/2 (təxminən 108-111 amin turşusu qalıqları ehtiva edir) yerləşir.Hər bir V bölgəsində zəncirdaxili disulfid bağlarından əmələ gələn bir peptid halqası var və hər bir peptid halqasında təxminən 67-75 amin turşusu qalığı var.V bölgəsində amin turşularının tərkibi və düzülüşü antikorun antigen bağlayan spesifikliyini müəyyən edir.V bölgəsindəki amin turşularının daim dəyişən növləri və ardıcıllığı sayəsində müxtəlif bağlayıcı antigen spesifikliyinə malik bir çox növ antikor əmələ gələ bilər.L zəncirinin və H zəncirinin V bölgələri müvafiq olaraq VL və VH adlanır.VL və VH-də bəzi yerli bölgələrin amin turşusu tərkibi və ardıcıllığı daha yüksək dərəcədə dəyişkənliyə malikdir.Bu bölgələrə hiperdəyişən bölgələr (HVR) deyilir.V bölgəsində amin turşusu tərkibi və qeyri-HVR hissələrinin düzülüşü nisbətən mühafizəkardır, buna çərçivə bölgəsi deyilir.VL-də adətən müvafiq olaraq 24-34 və 89-97 amin turşusu qalıqlarında yerləşən üç hiperdəyişən bölgə var.VL və VH-nin üç HVR-si müvafiq olaraq HVR1, HVR2 və HVR3 adlanır.X-şüalarının kristal difraksiyasının tədqiqi və təhlili sübut etdi ki, hiperdəyişən bölgə həqiqətən antikor antigeninin bağlandığı yerdir, ona görə də tamamlayıcılığı təyin edən bölgə (CDR) adlanır.VL və VH-nin HVR1, HVR2 və HVR3-ləri müvafiq olaraq CDR1, CDR2 və CDR3 adlandırmaq olar.Ümumiyyətlə, CDR3 daha yüksək dərəcədə hiperdəyişkənliyə malikdir.Hiperdəyişən bölgə həm də Ig molekullarının idiotipik determinantlarının mövcud olduğu əsas yerdir.Əksər hallarda H zənciri antigenə bağlanmada daha mühüm rol oynayır.
Sabit bölgə (C bölgəsi)H zəncirinin 3/4 və ya 4/5-də (təxminən 119-cu amin turşusundan C terminalına qədər) C son nöqtəsinə yaxın və 1/2 hissəsində (təxminən 105 amin turşusu qalığı var) L zəncirinin C ucunun yaxınlığında yerləşir.H zəncirinin hər bir funksional bölgəsində təxminən 110 amin turşusu qalığı var və disulfid bağları ilə bağlanmış 50-60 amin turşusu qalığından ibarət peptid halqası var.Bu bölgənin amin turşusu tərkibi və düzülüşü eyni heyvan Ig izotip L zəncirində və eyni tip H zəncirində nisbətən sabitdir.Eyni, o, yalnız müvafiq antigenə xüsusi olaraq bağlana bilər, lakin onun C bölgəsinin quruluşu eynidir, yəni eyni antigenliyə malikdir.At anti-insan IgG ikincil antikor (və ya anti-antikor) müxtəlif ekzotoksinlərə qarşı iki antikor birləşməsi (IgG) ilə birləşdirilə bilər.Bu, ikincil antikorların hazırlanması və flüoresan, izotoplar, fermentlər və digər etiketli antikorların tətbiqi üçün mühüm əsasdır.
 
 
Əlaqədar məhsullar:
Cell Direct RT-qPCR dəsti