mRNA peyvəndi nədir
mRNA peyvəndi müvafiq modifikasiyalardan sonra zülal antigenlərini ifadə etmək və istehsal etmək üçün RNT-ni orqanizmin hüceyrələrinə ötürür və bununla da orqanizmin antigenə qarşı immun reaksiyasını yaradır və bununla da orqanizmin immun imkanlarını genişləndirir.[1,3].
Şəkil 1: mRNT vaksininin birbaşa yeridilməsinin təsirinin sxematik diaqramı [2]
mRNT vaksinlərinin təsnifatı
mRNT vaksinləri iki növə bölünür:təkrarlanmayanmRNT vəözünü gücləndirənmRNA: özünü gücləndirən mRNA təkcə hədəf antigeni kodlamır, həm də hüceyrədaxili RNT gücləndirilməsini və protein ifadə mexanizmini təmin edən replikasiyanı kodlayır.Replikasiya etməyən mRNT vaksinləri yalnız hədəf antigenləri kodlayır və 5' və 3' tərcümə olunmamış bölgələri (UTR) ehtiva edir.Onlar uyğunlaşma qabiliyyətinin və fitri toxunulmazlığın hərtərəfli stimullaşdırılmasını, yəni yerində antigen ifadəsini və təhlükə siqnalının ötürülməsini təmin edir və aşağıdakı tətbiqlərə malikdir Xüsusiyyətlər[2,3]
●Uyğunlaşma qabiliyyətinin və fitri toxunulmazlığın hərtərəfli stimullaşdırılmasını, yəni yerində antigen ifadəsini və təhlükə siqnalının ötürülməsini təmin edə bilər.
●Humoral və hüceyrə effektorları və immun yaddaş da daxil olmaqla "balanslaşdırılmış" immun reaksiyaya səbəb ola bilər.
●Peyvənd formulunun mürəkkəbliyini artırmadan müxtəlif antigenləri birləşdirə bilir
●İmmun potensialının davamlı yaxşılaşdırılması təkrar peyvəndlə əldə edilə bilər və daşıyıcıya immun reaksiya yoxdur və ya azdır.
●İstiyə davamlı mRNT vaksinləri vaksinlərin daşınmasını və saxlanmasını asanlaşdıra bilər
Şəkil 2: mRNT vaksininin sxematik diaqramı və onun antigen ifadə mexanizmi [4]
mRNT vaksinlərinin xüsusiyyətləri
Ənənəvi peyvəndlərlə müqayisədə mRNT peyvəndləri sadə istehsal prosesləri, sürətli inkişaf sürəti, hüceyrə kulturasına ehtiyac yoxdur və aşağı qiymətə malikdir.DNT peyvəndləri ilə müqayisədə mRNT vaksinlərinin nüvəyə daxil olmasına ehtiyac yoxdur və ev sahibi genomuna inteqrasiya riski yoxdur.Yarımparçalanma müddəti modifikasiya ilə tənzimlənə bilər.
Cədvəl 1: mRNT vaksinlərinin üstünlükləri və mənfi cəhətləri
|
| Üstünlük | Çatışmazlıq |
| mRNT peyvəndi | Sürətli araşdırma və inkişaf, peyvəndin istehsalı cəmi 40 gün çəkir | Lazımsız bir immun reaksiyaya səbəb olun
|
| Fizioloji şəraitdə mRNT qeyri-sabitliyi, deqradasiyası asandır | Mümkün terapevtik mutasiyaların qarşısını almaq üçün genomla inteqrasiya olunmayacaq
| |
| Heç bir nüvə lokalizasiya siqnalına, transkripsiyaya ehtiyac yoxdur | Nüvə təhlükəsizliyinin effektivliyini yoxlamaq qalır
|
Şəkil 3: mRNA vaksinin istehsalı və hazırlanmasının axın qrafiki [4]
Foregene Viral RNT İzolyasiya dəsti
RT-qPCR Asan (Bir Addım)
mRNT vaksinlərinin hazırlanması üçün təkmilləşdirilmiş strategiyalar
mRNT-nin özünün zəif sabitliyi, toxumalarda nukleazlar tərəfindən asan deqradasiyası, aşağı hüceyrəyə daxil olma effektivliyi və aşağı tərcümə effektivliyi səbəbindən bu qüsurlar mRNT vaksinlərinin tətbiqini məhdudlaşdırır.Tərcümə səmərəliliyi də çox mühüm rol oynayır.Çatdırılma vasitələri viral vektorlara və qeyri-viral vektorlara (o cümlədən liposomlar, qeyri-liposomlar, viruslar, nanohissəciklər və s.) bölünə bilər.Buna görə də müvafiq təkmilləşdirmə tədbirlərinə ehtiyac var.Aşağıda mRNT hazırlanması üçün farmakoloji təkmilləşdirmə strategiyası verilmişdir[2]
1 Qapağın analoqlarını sintez edin və ya mRNT-ni sabitləşdirmək və eukaryotik tərcümənin başlanğıc faktoru 4E (EIF4E) ilə bağlanaraq protein tərcüməsini artırmaq üçün qapaq fermentlərindən istifadə edin.
2 mRNT-ni sabitləşdirmək və zülalın tərcüməsini artırmaq üçün 5′-translated region (UTR) və 3′-UTR elementlərini tənzimləyin.
3 Poly(A) quyruğunun əlavə edilməsi mRNT-ni stabilləşdirə və protein tərcüməsini artıra bilər
4 Anadangəlmə immun aktivləşdirməni azaltmaq və tərcüməni artırmaq üçün dəyişdirilmiş nukleozidlər
5 RNase III və sürətli protein maye xromatoqrafiyası (FPLC) ilə müalicə immun aktivləşdirməni azalda və tərcüməni artıra bilər.
6 Tərcüməni artırmaq üçün ardıcıllıqları və ya kodonları optimallaşdırın
7 Tərcümə başlama faktorlarının birgə çatdırılması və tərcümə və immunogenliyi dəyişdirmək üçün digər üsullar
Şəkil 4: In vitro transkripsiya (IVT) mRNA istehsalı və yığılması prosesi [5]
Plazmid DNT-nin geniş miqyaslı hazırlanması
Plazmid DNT-nin təmizlənməsi əsasən RNT, açıq dairəli DNT endotoksini, ana zülal və ana nuklein turşusu kimi çirkləndiriciləri təmizləyir və adətən rekombinant plazmidi E. coli-yə çevirir.E. coli yüksək sıxlıqlı fermentasiyaya məruz qalır, sonra bərk-maye ayrılır və E. coli toplanır.Daha sonra E. coli qələvi lizisə, lizisdən sonra mərkəzdənqaçma bərk-maye ayrılması və mikrofiltrasiya aydınlaşdırılmasına, aydınlaşdırıldıqdan sonra ultrafiltrasiyaya və konsentrasiyaya, sonra isə xromatoqrafik təmizləməyə məruz qalır.
Plazmid DNT-nin təmizlənməsi:
Foregene General Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNT疫苗研究进展及挑战[J].免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】Pardi N, Hoqan MJ, Porter FW, et al.mRNT peyvəndləri - vaksinologiyada yeni dövr [J].Təbiət Nəzərdən Drug Discovery, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) RNT Vaksinlərinə Giriş.In: Kramps T., Elbers K. (eds) RNT Vaccines.Methods in Molecular Biology, cild 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, et al.mRNT Yoluxucu Xəstəliklərə Nəzarət etmək üçün Peyvəndin İnkişafı üçün Transformativ Texnologiya kimi[J].Molekulyar terapiya, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, mRNA vaksininin doğuşdan/adaptiv immun reaksiyasını tarazlaşdırmaq üçün hazırlanması, Molekulyar təbabətdə tendensiyalar, cild 26, buraxılış 3,2020, səh. 311-323.
Göndərmə vaxtı: 05 avqust 2021-ci il
