Giriş:

RNT molekulları zülal, DNT və RNT kimi digər bioloji molekullarla geniş şəkildə qarşılıqlı əlaqədə ola bilir və beləliklə hüceyrələrdə və orqanizmlərdə makromolekulyar komplekslər şəklində mövcuddur.Bunların arasında RNT-zülal kompleksləri RNT-nin varlığı və funksiyası mühüm formalarından biridir.RNT-nin aşağı salınması RNT molekullarının, xüsusən də lncRNA molekullarının qarşılıqlı zülallarının skrininqi və müəyyən edilməsi üçün klassik üsuldur və tədqiqatçıların əksəriyyəti və beynəlxalq nüfuzlu akademik jurnallar tərəfindən tanınır.Bu gün FORREGENE sizinlə RNT-nin aşağı salınmasının eksperimental prinsipini və texniki prosesini paylaşacaq, bəlkə ondan istifadə edə bilərsiniz.

1. RNT çəkmə texnologiyasının eksperimental prinsipi:

Biotinlə işarələnmiş hədəf lncRNA və ya lncRNA fraqmentlərinin (müsbət və mənfi nəzarət kimi istifadə edilən RNT fraqmentləri daxil olmaqla) in vitro transkripsiyası və sintezi və hüceyrə ekstraktları ilə inkubasiya;RNT-protein və ya RNT-RNT komplekslərini toplamaq üçün avidinlə bağlanmış maqnit muncuqlarından istifadə edin, hərtərəfli yuyulduqdan sonra kompleks təmizlənir.lncRNA ilə qarşılıqlı əlaqədə olan zülal hədəf molekulu aşkar edilərsə, RNT-çəkmə məhsulunda zülal elektroforezi aparın, hədəf zülalı gümüşlə boyanaraq aşkar edin və kütlə spektrometri üçün geli kəsin;həmçinin birbaşa açılan məhsulda western blot yoxlamasını həyata keçirin;aşkar olunarsa lncRNA ilə qarşılıqlı əlaqədə olan RNT hədəf molekulları üçün RNT-çəkmə məhsulları RNT ekstraksiyasına məruz qalır və xüsusi qRT-PCR aşkarlanması həyata keçirilir.

2. RNT aşağı çəkmə texnologiyası sınaq prosesi:

3. FOREGENE-nin RNT-nin çıxarılması üçün texniki xidmət:

Hüceyrə mədəniyyəti

Hüceyrə total/nüvə/plazma zülalının ekstraktının hazırlanması

RNT aşağı çəkmə təcrübəsi

SDS-PAGE elektroforezi, gümüş ləkəsi

Kütləvi spektrometriya və DB təcrübələri

Eksperimental hesabat

4. Eksperimental vəziyyət

Aşağıdakı şəkildə FJ Bio-Bio-nun RNT-nin aşağı çəkilməsi və SDS-PAGE elektroforez aşkarlanmasının nəticələri göstərilir, burada qırmızı oxun fərq zolağı qeyd olunur:

Siçuan Universitetinin professoru Sonq Xunun tədqiqat qrupu lncRNA tədqiqatı sahəsində 15 illik uzunmüddətli yığım toplayıb.Foregene Bio və Professor Song Xu-nun tədqiqat qrupu lncRNA-nın RNT-nin aşağı çəkilməsi texnologiyasını işə salmaq üçün əməkdaşlıq etdi ki, bu da təcrübəniz üçün qənaətbəxş nəticə verəcəkdir.