Hot-start Taq fermenti geniş istifadə olunur.Adi DNT polimeraza ilə müqayisədə, isti başlanğıc Taq fermenti bəzi qeyri-spesifik gücləndirmə və primer dimerlərin meydana gəlməsindən effektiv şəkildə qaça bilər və hədəf genin gücləndirilməsinin müvəffəqiyyət dərəcəsini effektiv şəkildə artıra bilər.Xüsusilə genetik test sahəsində, isti başlanğıc Taq fermenti sənayedə məcburi bir standart olaraq təyin edilmişdir və adi DNT polimerazadan istifadə edilməməlidir.Yuxarıdakılardan göründüyü kimi, isti başlanğıc Taq fermentləri geniş istifadə olunur.Hal-hazırda daxili bazarda isti başlanğıc Taq fermentlərinin bir çox markası var, lakin yüksək keyfiyyətli qaynar başlanğıc Taq fermentləri çox deyil.Çox isti başlanğıc Taq ferment məhsulları ilə qarşılaşdıqda, necə seçməliyik?

1. Yüksək gücləndirmə effektivliyi ilə isti başlanğıc Taq fermentini seçin

PCR gücləndirilməsinin effektivliyi Taq fermentinin fəaliyyəti ilə sıx bağlıdır.Yaxşı bir Taq ferment reaksiya sistemi optimallaşdırıldıqdan sonra gücləndirmə səmərəliliyi 95% -dən yuxarıdır və ilkin şablon miqdarının gücləndirmə diapazonu genişdir.Hədəf gen tərkibi aşağı olduqda qənaətbəxş gücləndirmə əldə edilə bilər və şablon miqdarı yüksək olduqda və eksponensial gücləndirmə müddəti uzun olduqda zəhərlənmək asan deyil.Performansı zəif olan Taq fermenti üçün reaksiya sistemi dəfələrlə optimallaşdırılsa belə, gücləndirmə səmərəliliyi hələ də 90%-dən azdır, gücləndirmə əyrisinin “S” forması aydın deyil, yamac kiçikdir və əyri düzdür.Şablonun miqdarı az olduqda, onu gücləndirmək mümkün deyil, şablonun miqdarı çox olduqda, gücləndirmə effekti ideal deyil.Buna görə də, yüksək gücləndirmə effektivliyi olan DNT polimerazalarının seçilməsi PCR və qPCR-nin uğuru üçün çox vacibdir.

2. Güclü ferment gücünə malik isti başlanğıc Taq fermentini seçin

Taq fermentinin enzimatik gücü gücləndirmə səmərəliliyi ilə bağlıdır.Ümumiyyətlə, isti başlanğıc Taq fermentinin enzimatik gücü nə qədər güclü olarsa, PCR gücləndirilməsinin eksponensial artım dövrü nə qədər uzun olarsa, daha tipik “S-şəkilli” əyri, flüoresan siqnal dəyəri bir o qədər yüksəkdir və multipleks PCR aşkarlanması üçün daha uyğundur.Zəif enzimatik gücə malik marka DNT polimerazları ümumiyyətlə yalnız 2-pleks reaksiyalarını dəstəkləyə bilər.3-pleks reaksiyaları edərkən, gücləndirmə əyrisi aşağıdır, flüoresan siqnal dəyəri aşağıdır və tipik gücləndirmə əyrisi yoxdur, buna görə də nəticələri mühakimə etmək çətindir.

3. Yüksək həssaslığa malik isti başlanğıc Taq fermenti seçin

Ümumiyyətlə, DNT polimeraz yüksək gücləndirmə effektivliyinə və yüksək həssaslığa malikdir, lakin uyğunsuzluqlar da var.Əgər gücləndiriləcək nümunənin hədəf gen bolluğu azdırsa, Taq fermentinin gücləndirmə həssaslığını yoxlamaq tövsiyə olunur.Ən çox yayılmış aşkarlama üsulu hədəf gen plazmid fraqmentinin 10 qat və ya 5 qat qradient seyreltilməsi, daha aşağı seyreltmədə PCR aşkarlanması və daha yüksək aşkarlama həssaslığına malik isti başlanğıc Taq fermentinin seçilməsidir.

Yuxarıda deyilənlərdən görünür ki, tədqiqatçılar öz eksperimental tələblərinə və maliyyələşdirmə şərtlərinə uyğun seçim etməlidirlər.İsti başlanğıc Taq fermentinin gücləndirmə səmərəliliyini və həssaslığını aşkar etmək üçün gradient qatılma gücləndirmə təcrübəsini etmək ən yaxşısıdır.

Foregene nümunəsi's Taq DNT Polimeraz:

Foreasy HS Taq DNT Polimeraz

Təsvir

Foreasy HS Taq DNT Polimerase gen rekombinasiya texnologiyası ilə Escherichia coli mühəndislik bakteriyalarında ifadə edilən DNT polimerazdır.Ferment unikal reaksiya tamponu ilə birləşdirilir ki, bu da məhsulu yüksək dərəcədə davamlı və uyğun edir və aşkarlama reaksiyaları üçün şablon kimi nümunə lizatını (Foregene Lysis sistemi) birbaşa istifadə edə bilir.

Ərizə

Keyfiyyətli PCR və təmizlənmiş şablonların və təmizlənməmiş şablonların kəmiyyət PCR aşkarlanması.

Keyfiyyətə nəzarət

1.Heç bir ekzogen nukleaz aktivliyi aşkar edilmədi

2. Host olmadan qalıq genomik DNT-nin aşkarlanması üçün PCR üsulu

3.İnsan genomunda tək nüsxəli genləri effektiv şəkildə gücləndirə bilər

4.Otaq temperaturunda bir həftə saxlayın, aktivlik nəzərəçarpacaq dərəcədə dəyişir

Məhsul təfərrüatları: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/