Patogen mikroorqanizmlər insan orqanizminə nüfuz edə bilən, infeksiyalara və hətta yoluxucu xəstəliklərə və ya patogenlərə səbəb ola bilən mikroorqanizmlərdir.Patogenlər arasında bakteriya və viruslar ən çox zərərlidir.

İnfeksiya insanların xəstələnməsinin və ölümünün əsas səbəblərindən biridir.20-ci əsrin əvvəllərində antimikrob dərmanların kəşfi müasir təbabəti dəyişdi, insanlara infeksiyalarla mübarizə üçün “silah” verdi, həmçinin cərrahiyyə, orqan transplantasiyası və xərçəng müalicəsini mümkün etdi.Bununla belə, viruslar, bakteriyalar, göbələklər və digər mikroorqanizmlər də daxil olmaqla, yoluxucu xəstəliklərə səbəb olan bir çox patogenlər var.Müxtəlif xəstəliklərin diaqnostikasını və müalicəsini təkmilləşdirmək, insanların sağlamlığını qorumaq məqsədi ilə

Sağlamlıq daha dəqiq və sürətli klinik sınaq üsulları tələb edir.Beləliklə, mikrobioloji aşkarlama texnologiyaları hansılardır?

01 Ənənəvi aşkarlama üsulu

Patogen mikroorqanizmlərin ənənəvi aşkarlanması prosesində onların əksəriyyətinin rənglənməsi, kultivasiyası tələb olunur və bu əsasda bioloji identifikasiya aparılır ki, müxtəlif növ mikroorqanizmlər identifikasiya olunsun və aşkarlama dəyəri yüksək olur.Ənənəvi aşkarlama üsullarına əsasən yaxma mikroskopiyası, ayırma mədəniyyəti və biokimyəvi reaksiya və toxuma hüceyrə mədəniyyəti daxildir.

1 Yaxma mikroskopiyası

Patogen mikroorqanizmlər kiçik ölçülüdür və əksəriyyəti rəngsiz və şəffafdır.Onları rənglədikdən sonra mikroskopun köməyi ilə onların ölçüsünü, formasını, düzülməsini və s. müşahidə etmək olar.Birbaşa yaxmanın boyanması mikroskopik müayinə sadə və sürətlidir və hələ də erkən ilkin diaqnoz üçün qonokok infeksiyası, mikobakteriya vərəmi, spiroketal infeksiya və s. kimi xüsusi formaları olan patogen mikrob infeksiyalarına tətbiq olunur.Birbaşa fotomikroskopik müayinə üsulu daha sürətlidir və patogenlərin xüsusi formalarla vizual müayinəsi üçün istifadə edilə bilər.Bunun üçün xüsusi alətlər və avadanlıqlar tələb olunmur.Bu, hələ də əsas laboratoriyalarda patogen mikroorqanizmlərin aşkarlanması üçün çox vacib bir vasitədir.

2 Ayırma kulturası və biokimyəvi reaksiya

Separasiya kulturası əsasən bir çox bakteriya növü olduqda və onlardan birinin ayrılması lazım olduqda istifadə olunur.Daha çox bəlğəmdə, nəcisdə, qanda, bədən mayelərində və s. istifadə olunur. Bakteriyalar uzun müddət böyüyüb çoxaldığı üçün bu müayinə üsulu müəyyən vaxt tələb edir., Və partiyalarla emal edilə bilməz, buna görə də tibb sahəsi ənənəvi təlim metodlarını təkmilləşdirmək və aşkarlamanın dəqiqliyini artırmaq üçün avtomatlaşdırılmış təlim və identifikasiya avadanlıqlarından istifadə edərək, bu barədə tədqiqat aparmağa davam etdi.

3 Toxuma hüceyrə kulturası

Toxuma hüceyrələrinə əsasən xlamidiya, viruslar və rikketsiya daxildir.Fərqli patogen mikroorqanizmlərdə toxuma hüceyrələrinin növləri fərqli olduğundan, toxumalar patogen mikroorqanizmlərdən çıxarıldıqdan sonra canlı hüceyrələr subkultura ilə becərilməlidir.Becərilmiş patogen mikroorqanizmlər hüceyrə patoloji dəyişikliklərini mümkün qədər azaltmaq üçün kultivasiya üçün toxuma hüceyrələrinə aşılanır.Bundan əlavə, toxuma hüceyrələrinin kultivasiyası prosesində həssas heyvanlara patogen mikroorqanizmləri birbaşa aşılamaq, sonra isə heyvanların toxuma və orqanlarında baş verən dəyişikliklərə uyğun olaraq patogenlərin xüsusiyyətlərini yoxlamaq olar.

02 Genetik test texnologiyası

Dünyada tibbi texnologiyanın səviyyəsinin davamlı olaraq təkmilləşdirilməsi ilə patogen mikroorqanizmləri effektiv müəyyən edə bilən molekulyar bioloji aşkarlama texnologiyasının inkişafı və tərəqqisi həm də ənənəvi aşkarlama prosesində xarici morfoloji və fizioloji xüsusiyyətlərin tətbiqinin mövcud vəziyyətini yaxşılaşdıra bilər və unikal genlərdən istifadə edə bilər. özünəməxsus üstünlükləri ilə.

1 Polimeraza zəncirvari reaksiya (PCR)

Polimeraza zəncirvari reaksiya (Polymerase Chain Reaction, PCR) in vitro naməlum fraqmentdə sınaqdan keçiriləcək gen fraqmentinin kiçik bir hissəsini istiqamətləndirmək və gücləndirmək üçün məlum oliqonukleotid primerlərindən istifadə edən bir texnikadır.PCR test ediləcək geni gücləndirə bildiyindən, patogen infeksiyanın erkən diaqnostikası üçün xüsusilə uyğundur, lakin primerlər spesifik deyilsə, yanlış pozitivlərə səbəb ola bilər.PCR texnologiyası son 20 ildə sürətlə inkişaf edib və onun etibarlılığı genin gücləndirilməsindən genin klonlaşdırılmasına və transformasiyasına və genetik analizə qədər tədricən yaxşılaşıb.Bu üsul həm də bu epidemiyada yeni koronavirusun əsas aşkarlama üsuludur.

Foregene Böyük Britaniya, Braziliya, Cənubi Afrika və Hindistandan normal 2 genin, 3 genin və variantın, müvafiq olaraq B.1.1.7 soyunun (Böyük Britaniya), B.1.351 nəslinin (ZA), B.1.617 nəslinin (IND) və P.1 nəslinin (BR) aşkarlanması üçün Foregene Direct PCR texnologiyasına əsaslanan RT-PCR dəstini hazırlayıb.

2 Gen çip texnologiyası

Gen çipi texnologiyası yüksək sıxlıqlı DNT fraqmentlərini yüksək sürətli robototexnika və ya in-situ sintez vasitəsilə müəyyən qaydada və ya düzülmə ilə membranlar və şüşə təbəqələr kimi bərk səthlərə əlavə etmək üçün mikroarray texnologiyasından istifadəni nəzərdə tutur.İzotoplar və ya flüoresan ilə etiketlənmiş DNT zondları ilə və əsas tamamlayıcı hibridləşmə prinsipinin köməyi ilə gen ifadəsi və monitorinq kimi çox sayda tədqiqat texnikası həyata keçirilmişdir.Patogen mikroorqanizmlərin diaqnostikasında gen çip texnologiyasının tətbiqi diaqnoz müddətini əhəmiyyətli dərəcədə qısalda bilər.Eyni zamanda, patogenin dərmana qarşı müqaviməti olub-olmadığını, hansı dərmanlara davamlı olduğunu və hansı dərmanlara həssas olduğunu müəyyən edə bilər ki, bu da klinik dərmanlara istinadlar təmin etsin.Bununla belə, bu texnologiyanın istehsal dəyəri nisbətən yüksəkdir və çip aşkarlanmasının həssaslığını artırmaq lazımdır.Buna görə də, bu texnologiya hələ də laboratoriya tədqiqatlarında istifadə olunur və klinik praktikada geniş istifadə edilməmişdir.

3 Nuklein turşusunun hibridləşdirilməsi texnologiyası

Nuklein turşusunun hibridləşməsi patogen mikroorqanizmlərdə tamamlayıcı ardıcıllıqla olan tək nükleotid zəncirlərinin hüceyrələrdə birləşərək heteroduplekslər əmələ gətirdiyi bir prosesdir.Hibridləşməyə səbəb olan amil patogen mikroorqanizmləri müəyyən etmək üçün nuklein turşusu və zondlar arasında kimyəvi reaksiyadır.Hazırda patogen mikroorqanizmləri aşkar etmək üçün istifadə edilən nuklein turşusunun təkrar krossinqi üsullarına əsasən nuklein turşusunun in situ hibridləşdirilməsi və membran ləkələrinin hibridləşdirilməsi daxildir.Nuklein turşusunun in situ hibridləşməsi patogen hüceyrələrdəki nuklein turşularının etiketli zondlarla hibridləşməsinə aiddir.Membran ləkəsinin hibridləşdirilməsi o deməkdir ki, eksperimentator patogen hüceyrənin nuklein turşusunu ayırdıqdan sonra təmizlənir və bərk dayaq ilə birləşdirilir, sonra isə uçot zondu ilə hibridləşdirilir.Mühasibat hibridləşdirmə texnologiyası rahat və sürətli işləmə üstünlüklərinə malikdir və həssas və məqsədyönlü patogen mikroorqanizmlər üçün uyğundur.

03 Seroloji testlər

Seroloji testlər patogen mikroorqanizmləri tez bir zamanda müəyyən edə bilər.Seroloji test texnologiyasının əsas prinsipi məlum patogen antigenlər və antikorlar vasitəsilə patogenləri aşkar etməkdir.Ənənəvi hüceyrə ayrılması və mədəniyyəti ilə müqayisədə seroloji testin əməliyyat addımları sadədir.Ümumi istifadə edilən aşkarlama üsullarına lateks aglütinasiya testi və fermentlə əlaqəli immunoassay texnologiyası daxildir.Fermentlə əlaqəli immunoassay texnologiyasının tətbiqi seroloji testin həssaslığını və spesifikliyini xeyli yaxşılaşdıra bilər.O, yalnız test nümunəsindəki antigeni deyil, həm də antikor komponentini aşkar edə bilər.

2020-ci ilin sentyabr ayında Amerika Yoluxucu Xəstəliklər Cəmiyyəti (IDSA) COVID-19 diaqnozu üçün seroloji test üçün təlimatlar verdi.

04 İmmunoloji test

İmmunoloji aşkarlama həmçinin immunomaqnit muncuq ayırma texnologiyası adlanır.Bu texnologiya patogenlərdə patogen və qeyri-patogen bakteriyaları ayıra bilir.Əsas prinsip budur: tək antigeni və ya bir neçə növ xüsusi patogenləri ayırmaq üçün maqnit muncuq mikrosferlərinin istifadəsi.Antigenlər birlikdə yığılır və patogen bakteriyalar antigen cismi və xarici maqnit sahəsinin reaksiyası ilə patogenlərdən ayrılır.

Patogen aşkarlanması qaynar nöqtələr-tənəffüs patogenlərinin aşkarlanması

Foregene-nin “15 tənəffüs sistemi patogen bakteriyaların aşkarlanması dəsti” inkişaf mərhələsindədir.Kit bəlğəmdəki nuklein turşusunu təmizləməyə ehtiyac olmadan bəlğəmdə 15 növ patogen bakteriya aşkar edə bilir.Effektivlik baxımından orijinal 3 ilə 5 gündən 1,5 saata qədər qısaldır.