RNT çıxarmaq üçün hələ də Trizol istifadə edirsiniz?
Vallah, səhhətinə görə narahat olmayım!
Trizol marginallaşmaq üzrədir, mənə hələ qaranlıqda olduğunu söyləmə?

Trizol reagentinin əsas komponenti fenoldur və eksperimental əməliyyatda xloroform kimi üzvi reagentlər də əlavə edilir.Uzun müddətli məruz qalma sağlamlığınıza zərər verə bilər, xüsusən də birbaşa dəri təması ciddi kimyəvi yanıqlara və qalıcı çapıqlara səbəb ola bilər.

Normal şəraitdə laboratoriya partnyorları yalnız tam silahlanmaqla (laborator paltarları, əlcəklər və maskalar taxmaqla) təhlükələri azalda bilərlər.

Və sizə məsləhətim budur: mənbədən zərər görməmək üçün Trizolu birbaşa dəyişdirin.

1. RNT ekstraksiyasının birinci nəsil məhsulu
1987-ci ildə çıxdı (Trizol reagentləri)

üstünlük:
Daha tam çıxarış

Dezavantajları:
Quanidin izotiyosiyanat-fenol-xloroform kimi zəhərli reagentlər tələb olunur;
Çətin əməliyyat;
DNT çirklənməsini aradan qaldırmaq üçün DNase istifadə etmək lazımdır

2. RNT ekstraksiyasının ikinci nəsil məhsulu
1994-cü ildə çıxdı (QIAGEN RNeasy və əksər yerli məhsullar)

üstünlük:
İstifadəsi asan olan sütun mərkəzdənqaçma üsulu qəbul edilir;

Dezavantaj:
Doku zibilini çıxarmaq üçün sentrifuqa etmək lazımdır
DNT çirklənməsini aradan qaldırmaq üçün DNase istifadə etmək lazımdır

3.RNT ekstraksiyasının üçüncü nəsil məhsulu
2005-ci ildə çıxdı (QIAGEN RNeasy Plus və ForegenRNT təmizləmə seriyası məhsulları)

üstünlük:
DNT-ni və toxuma zibilini eyni vaxtda çıxarmaq üçün DNT-nin çıxarılması sütunundan birbaşa istifadə edin, vaxta və səyə qənaət edin;
Təhlükəsiz və rahat, çirkləri asanlıqla çıxarmaq və DNT-nin çirklənməsinin qarşısını almaq üçün filtr sütunu və DNase əlavə etməyə ehtiyac yoxdur

Birinci nəsil məhsul (Trizol), ikinci nəsil məhsul (RNeasy) və RNT ekstraksiyasının üçüncü nəsil məhsulu (Foregene) arasındakı əməliyyat fərqlərinə baxaq:

Şəkildəki əməliyyat aydındır: üçüncü nəsil məhsulun açıq üstünlükləri var

Təsvir etmək üçün sadəcə üç söz: asan!Tez!Təhlükəsizlik

Eksperimental nəticələrin PK diaqramıüçünRNT ekstraksiyasının birinci nəsil, ikinci nəsil və üçüncü nəsil məhsulları:

1. Eelektroforetoqramma

Birinci nəsil (1: Trizol)
İkinci nəsil (2:QIAGEN RNeasy)
Üçüncü nəsil (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Hansı məhsul yaxşıdır, müqayisə edərək biləcəksiniz
Foregene dəsti ilə çıxarılan RNT
Yalnız yüksək konsentrasiya deyil, həm də yaxşı dürüstlük

2.qPCR qrafiki (gücləndirici əyri qrafiki)

Birinci nəsil (Trizol)

İkinci nəsil (göy mavisideməkdirQIAGEN RNeasy-, qırmızıdeməkdirQIAGEN RNeasy +)

Üçüncü nəsil (mavi Foregene, yaşıl QIAGEN RNeasy plus deməkdir)

(Qeyd: QPCR qrafikinin ikinci nəsil QIAGEN RNeasy o deməkdir ki, dəst DNaz əlavə etmir və DNT çirklənməsini aradan qaldırmır. Buna görə də CT daha yüksəkdir və nəticə dəqiq deyil; QIAGEN RNeasy + o deməkdir ki, DNaz əlavə edilib və DNT çirklənməsi aradan qaldırılıb və nəticə dəqiqdir)

İstər elektroforetoqram, istərsə də kəmiyyət PCR gücləndirmə əyri qrafiki olsun, Foregene məhsullarının keyfiyyəti xaricdən gətirilən məhsullardan heç də aşağı deyil.