Viral DNT və RNT İzolyasiya Kiti Viral DNT və RNT Ekstraksiyasının Təmizlənməsi üçün Hazırlıq Dəstləri
Spesifikasiyalar
50 hazırlıq, 200 hazırlıq
Viral RNT Nuklein turşusu Təmizləyici Ekstraksiya İzolyasiya Kiti Foregene tərəfindən hazırlanmış spin sütunu və formulasından istifadə edir ki, bu da plazma, zərdab, hüceyrəsiz bədən mayesi və hüceyrə mədəniyyətinin supernatantı kimi nümunələrdən yüksək təmizlik və yüksək keyfiyyətli viral RNT-ni səmərəli şəkildə çıxara bilir.Kit xüsusi olaraq nümunələrdən kiçik miqdarda RNT ələ keçirə bilən Xətti Akrilamid əlavə edir.Yalnız RNT Sütunu RNT-ni effektiv şəkildə bağlaya bilər.Kit eyni zamanda çoxlu sayda nümunəni emal edə bilər.
Bütün dəstdə RNaz yoxdur, ona görə də təmizlənmiş RNT pozulmayacaq.Bufer viRW1 və Bufer viRW2 əldə edilən viral nuklein turşusunun zülal, nukleaz və ya digər çirklərdən azad olmasını təmin edə bilər ki, bu da birbaşa aşağı axın molekulyar biologiya təcrübələri üçün istifadə edilə bilər.
Kit komponentləri
| Xətti Akrilamid |
| Bufer DRL |
| Bufer RW1, Bufer RW2 |
| RNazsız ddH2O |
| DNT/RNT sütunu |
| Təlimatlar |
Xüsusiyyətlər və üstünlüklər
■ Bütün proses boyu otaq temperaturunda (15-25 ℃) işləmə, buz vannası və aşağı temperaturda sentrifuqasiya olmadan.
■ Tam dəst RNase-Free, RNT deqradasiyası barədə narahat olmağa ehtiyac yoxdur.
■ Yüksək nuklein turşusu məhsuldarlığı: yalnız DNT/RNT sütunu və unikal formula DNT və RNT-ni effektiv şəkildə təmizləyə bilər.
■ Böyük nümunə emal gücü: hər dəfə 200μl-ə qədər nümunə emal edilə bilər.
■ Sürətli sürət: işləmək asandır və 20 dəqiqə ərzində tamamlana bilər.
■ Təhlükəsizlik: heç bir üzvi reagent tələb olunmur.
■ Yüksək keyfiyyət: Təmizlənmiş RNT fraqmentləri yüksək təmizliyə malikdir, zülaldan və digər çirklərdən azaddır və müxtəlif aşağı axın eksperimental tətbiqlərinə cavab verə bilər.
Kit tətbiqi
Plazma, serum, hüceyrəsiz bədən mayesi və hüceyrə mədəniyyətinin supernatantı kimi nümunələrdə viral nuklein turşusunun çıxarılması və təmizlənməsi üçün uyğundur.
İş axını
Diaqram
Saxlama və Raf ömrü
■ Bu dəst quru şəraitdə otaq temperaturunda (15-25 ℃) 24 ay saxlanıla bilər;daha uzun müddət saxlamaq lazımdırsa, 2–8°C temperaturda saxlanıla bilər.
■ Xətti Akrilamid məhlulu otaq temperaturunda 7 gün saxlanıla bilər;dəsti aldıqdan sonra onu çıxarın və -20°C temperaturda saxlayın.
■ Bufer DRL-ə Xətti Akrilamid əlavə etdikdən sonra o, 2-8°C temperaturda 48 saata qədər saxlanıla bilər.Hazır məhluldan istifadə edin.
Problemin Təhlili Bələdçisi
Aşağıda viral DNT/RNT-nin çıxarılması zamanı rastlaşa biləcək problemlərin təhlili verilmişdir və bu, təcrübələriniz üçün faydalı olacaqdır.Bundan əlavə, əməliyyat təlimatları və problem təhlili istisna olmaqla, digər eksperimental və ya texniki problemlər üçün biz sizə kömək etmək üçün texniki dəstəyi ayırmışıq.Hər hansı bir ehtiyacınız varsa, bizimlə əlaqə saxlayın: 028-83360257 və ya E-poçt:
Tech@foregene.com.
Nuklein turşusu hasilatı yoxdur və ya aşağı nuklein turşusu hasilatı yoxdur
Adətən bərpa səmərəliliyinə təsir edən bir çox amillər var, məsələn: nümunənin nuklein turşusunun tərkibi, əməliyyat üsulu, elüsyonun həcmi və s.
Ümumi səbəblərin təhlili:
1. Prosedur zamanı buz vannası və ya aşağı temperaturda (4°C) sentrifuqalama aparıldı.
Təklif: Bütün proses boyu otaq temperaturunda (15-25°C) işləyin, buz vannası və aşağı temperaturda sentrifuqa etməyin.
2. Nümunə düzgün saxlanmayıb və ya nümunə çox uzun müddət saxlanılıb.
Tövsiyə: Nümunələri -80°C temperaturda saxlayın və təkrar dondurulma və ərimədən çəkinin;nuklein turşusunun çıxarılması üçün təzə toplanmış nümunələrdən istifadə etməyə çalışın.
3. Qeyri-kafi nümunə lizisi.
Tövsiyə: Lütfən, nümunənin və liziz üçün işləyən məhlulun hərtərəfli qarışdırıldığından və otaq temperaturunda (15-25°C) 10 dəqiqə inkubasiya olunduğundan əmin olun.
4. Eluentin səhv əlavə edilməsi.
Təklif: RNase-Free ddH2O-nun təmizləyici sütun membranının ortasına damcı şəkildə əlavə olunduğundan əmin olun və onu təmizləmə sütunu halqasına atmayın.
5. RW2 tamponuna mütləq etanolun düzgün həcmi əlavə edilməmişdir.
Təklif: Təlimatlara əməl edin, RW2 tamponuna mütləq etanolun düzgün həcmini əlavə edin və dəsti istifadə etməzdən əvvəl yaxşıca qarışdırın.
6. Müvafiq olmayan nümunə həcmi.
Təklif: Hər 500µl Bufer DRL üçün 200µl nümunə işlənir.Həddindən artıq nümunə emalı aşağı nuklein turşusu hasilatı ilə nəticələnəcək.
7. Qeyri-adekvat elüsyon həcmi və ya natamam elüsyon.
Tövsiyə: Təmizləmə sütununun eluent həcmi 30-50μl-dir;elüsyon effekti qənaətbəxş deyilsə, əvvəlcədən qızdırılmış RNase-Free ddH2O əlavə etdikdən sonra otaq temperaturunda vaxtı uzatmaq tövsiyə olunur, məsələn 5-10 dəqiqə.
8. Buffer RW2 ilə yuyulduqdan sonra etanol sütunda qalır.
Təklif: Bufer RW2 ilə sentrifuqadan sonra etanol 2 dəqiqə qalsa, qalıq etanolun tam çıxarılması üçün sütun sentrifuqadan sonra 5 dəqiqə otaq temperaturunda yerləşdirilə bilər.
Təmizlənmiş nuklein turşusu parçalanır
Təmizlənmiş nuklein turşusunun keyfiyyəti nümunənin saxlanması, RNaz ilə çirklənməsi, işləməsi və digər amillərlə bağlıdır.Ümumi səbəblərin təhlili:
1. Toplanmış nümunələr vaxtında saxlanmayıb.
Təklif: Nümunə toplandıqdan sonra vaxtında istifadə olunmazsa, onu dərhal aşağı temperaturda -80°C-də saxlayın.RNT çıxarılması üçün təzə toplanmış nümunələrdən istifadə etməyə çalışın.
2. Nümunələri toplayın və dəfələrlə dondurun və əridin.
Təklif: Nümunələrin toplanması və saxlanması zamanı dondurulma və ərimə (bir dəfədən çox olmamaq şərti ilə) çəkinin, əks halda nuklein turşusunun məhsuldarlığı azalacaq.
3. Əməliyyat otağında RNase tətbiq edilir və ya birdəfəlik əlcəklər, maskalar və s. geyilmir.
Tövsiyə: RNT çıxarılması təcrübələri ən yaxşı ayrı RNT əməliyyat otağında aparılır və laboratoriya masası təcrübədən əvvəl təmizlənməlidir.
Təcrübə zamanı RNaz-ın tətbiqi nəticəsində yaranan RNT deqradasiyasının qarşısını almaq üçün birdəfəlik əlcəklər və maskalar taxın.
4. İstifadə zamanı reagent RNase ilə çirklənmişdir.
Tövsiyə: Müvafiq təcrübələr üçün yeni Viral DNT/RNT İzolyasiya Kiti ilə əvəz edin.
5. RNT manipulyasiyası üçün istifadə edilən sentrifuqa boruları və pipet ucları RNaz ilə çirklənmişdir.
Təklif: RNT çıxarılması üçün istifadə edilən sentrifuqa borularının, pipetlərin uclarının, pipetlərin və s.-nin hamısının RNase-siz olduğuna əmin olun.
Təmizlənmiş nuklein turşusu aşağı axın təcrübələrinə təsir göstərir
Təmizləmə sütunu ilə təmizlənmiş DNT və RNT, duz ionu və zülal tərkibi çox yüksək olarsa, bu, aşağı axın təcrübələrinə təsir edəcəkdir, məsələn: PCR gücləndirilməsi, əks transkripsiya və s.
1. Elüt edilmiş DNT və RNT-də qalıq duz ionları var.
Təklif: RW2 tamponuna mütləq etanolun düzgün həcminin əlavə olunduğuna əmin olun və təmizləyici sütunu iki dəfə istismar təlimatında göstərilən sentrifuqa sürətində yuyun;Duz ionunun çirklənməsini minimuma endirmək üçün sentrifuqa edin.
2. Elüt edilmiş DNT və RNT-də etanol qalıqları var.
Təklif: Bufer RW2 ilə yuyulmanı təsdiq etdikdən sonra, əməliyyat təlimatlarında göstərilən sentrifuqa sürətində boş borunun sentrifuqasını həyata keçirin;əgər hələ də etanol qalığı varsa, siz boş borunu sentrifuqa edə və sonra etanol qalığını maksimum dərəcədə təmizləmək üçün onu otaq temperaturunda 5 dəqiqə qoya bilərsiniz.
Təlimat kitabçaları:
Viral DNT və RNT İzolyasiya Kiti Təlimat Kitabı
